0
 
Кабинет
Краснодарский край, г. Абинск, ул. Советов 67
Главная Блог Тодикамп Тодикамп - исследования на животных

Тодикамп - исследования на животных

← Предыдущая Следующая →
0
34

Данная статья о лечении тодикампом - это удобная для вашего чтения выборка из диссертационной работы доктора фармацевтических наук Стреляевой, Ангелины Вадимовны.

Оригинал размещён здесь

Тысячелетиями человечество использует лекарственные растения для лечения различных заболеваний. Обилие синтетических лекарственных препаратов, ставших причиной аллергических и хронических заболеваний, привели в настоящее время к возрастанию интереса к лекарственным растениям. Препараты лекарственных растений занимают значительный удельный вес в общем объеме лекарственных средств.

Перспективные лекарственные растения, на основе которых созданы препараты широкого спектра действия, заслуживают особого внимания исследователей.

Зелёный грецкий орех, как основа тодикампа

Грецкий орех (Juglans regia L.) - лекарственное растение, которому посвяшено более 10 тысяч литературных источников, отражающих использование его в народной медицине и ветеринарии. Применяется гомеопатический препарат югланс, изготовленный из листьев грецкого ореха (Кент Л.Т., 1997).

По данным E.Barbas et al. (1993), D.Chenevard et al. (1994), Р.Э.Лойко и Т.С.Ширко (1994), З.А. Троян и соавт. (1999), плоды, листья грецкого ореха содержат большое количество биологически активных веществ, в том числе витамины, жирные кислоты, макро- и микроэлементы. Фармацевтическая наука еще недостаточно использовала лекарственные возможности этого растения.

Л.Г.Маленков и соавт. (1995) запатентовали препарат тодикамп, полученный из плодов грецкого ореха молочно-восковой спелости с помощью нефтяной фракции ленефр, представляющей собой часть нефти, выкипающей при температуре до 150"С. Еще до этого более 30 лет керосиновый экстракт зеленых плодов грецкого ореха успешно применялся в народной медицине для лечения радикулита, простатита, цирроза печени, иммунодефицита, опухолей (Кашницкий С., 1990).

Почему керосин?

В настоящее время используются лекарственные препараты, полученные из нефтепродуктов. Так, например, вазелиновое масло - продукт очищенной нефти, применяется внутрь детям и взрослым при запорах (Машков-ский М.Д., 1989, 1999; Харкевич Д.А., 1993, 1999). В России и других странах применяется препарат петролеум, изготовленный из нефти (Шаретт Ж., 1997, Глаз В.Г., 1998), обладающий широким спектром фармакологического действия. Петролеум используется с 1913 г. (Френкель Л.Д., 1913, 1993) без побочного и токсического действия, а в настоящее время свободно реализуется в аптеках России.

Для борьбы с паразитами

По данным Г.Г.Онищенко (2000), в России ежегодно страдают паразитарными болезнями более одного млп людей. Такое заболевание как эхнно-коккоз сопровождается вторичным иммунодефицитом и функциональной недостаточностью печени (Гостищев В.К. и др., 1999, 2000, Бирюков Ю.В. и др., 1999-2002, Чебышев Н.В. и др., 1998-2002). Отсутствие достаточного количества отечественных препаратов на основе лекарственного растительного сырья, обладающих противоэхинококкозным, гепатопротекторным, им-мунотропным свойствами, делают проблему актуальной.

В Таджикистане в 90-х годах был изготовлен тодикамп, который поступил в реализацию в Узбекистане. Тодикамп и чеблин-СК-1 (ЧСК-1), полученный нами и представляющий собой керосиновый экстракт из зеленых плодов грецкого ореха молочно-восковой спелости, также стали использовать при лечении людей и животных. Ситуация не контролировалась медицинской и ветеринарной практикой и наукой. В связи с этим представляется целесообразным изучение токсичности и фармакологической активности препаратов на основе лекарственного растительного сырья и экстрагентов из нефтепродуктов. Требует анализа клиническое испытание тодикампа и ЧСК-1.

Целью исследования явилось изучение фармакологической активности и токсичности препаратов тодикампа и ЧСК-1, а также других лекарственных средств, изготавливаемых экстрагированием растительного сырья с помощью очищенных нефтепродуктов.


Задачи исследования

1. Изучить химический состав плодов грецкого ореха в процессе созревания для определения оптимальных сроков заготовки сырья.

2. Провести экспериментальное исследование состава углеводородного экстракта зеленых плодов грецкого ореха.

3. Изучить, острую токсичность при внутрижелудочном введении препаратов, полученных из лекарственного растительного сырья с использованием новых экстрагентов.

4. Изучить хроническую токсичность при длительных внутрижелудоч-ных введениях и аппликаций кожи животным тодикампа и ЧСК-1.

5. Определить иммунотоксичность, аллергизирующую способность, эм-бриотоксичность, тератогенность, мутагенность, ДНК-повреждающее действие тодикампа и ЧСК-1.

6. Изучить фармакологическое действие препаратов, полученных из растительного лекарственного сырья с использованием новых экстрагентов:

а) противопаразитарную активность изучаемых препаратов;

б) гепатопротекторное, иммуномодулирующее, противомикробное свойства изучаемых препаратов.

7. Разработать лабораторную модель для коррекции остаточной полости при эхинококкэктомии и применения противопаразитарных средств.

8. Разработать новый метод иммунодиагностики эхинококкозов.

9. Оценить клинические испытания тодикампа и ЧСК-1 в Республике Узбекистан.

10.Разработать рекомендации по использованию результатов исследований.


Химический состав зеленых плодов грецкого ореха Нами по общепринятым методикам было исследовано 12 образцов зеленых плодов грецкого ореха на разных стадиях молочной зрелости. Использовано 12 деревьев 40-летнего возраста сорта, созданного учеными Института виноградарства и садоводства им. Шредера, с которых плоды срывались с 4 по 9 мая (первый сбор), с 16 - 19 мая (второй сбор), с 25 по 28 мая (третий сбор), с 1 по 7 июля (четвертый сбор), с 1 по 5 октября (пятый сбор).

Данные, представленные в табл.1, показывают, что наименьшее количество липофильных и гидрофильных биологически активных веществ содержится в плодах грецкого ореха в первой декаде мая. По мере созревания плодов идет увеличение количества этих веществ.

Содержание золы и некоторых веществ может несколько отличаться в зависимости от года сбора. Так, химический состав зеленых плодов ореха, собранных в первой декаде мая 1998 года (табл.1), несколько отличается по содержанию золы урожая 1999 года (табл.2). Количество минеральных веществ в плодах грецкого ореха в зависимости от времени года также подвергалось изменениям (табл. 2 и рис.1). Наибольшее количество золы, общего азота, фосфора и калия содержалось в семенах зрелого ореха в первых числах октября, наименьшее - в первой декаде мая. Микроэлементы в плодах ореха накапливаются по мере их созревания (рис. 2). Нами установлено, что в плодах грецкого ореха накапливаются в достаточном количестве как липо-

фильные, так и гидрофильные биологически активные вещества, что может служить основой для создания различных лекарственных средств.

Показано, что наибольшее количество витаминов накапливается в зеленых плодах грецкого ореха в третьей декаде мая, затем резко снижается, а в зрелых плодах (ядре) остаются следы некоторых витаминов (табл.3). Например, содержание аскорбиновой кислоты в первой декаде мая достигает 701 мг % на сырую массу, максимум регистрируется в третьей декаде мая -2775,5 мг % на сырую массу, в зрелых плодах обнаруживаются её следы. Витамины: Bi, В2, РР, каротин в максимальном количестве обнаруживается в третьей декаде мая, а к сентябрю - октябрю их содержание снижается в несколько раз (рис. 3).

Из масла плодов грецкого ореха нами были выделены следующие жирные кислоты: каприоловая (0,1-0,2%), лауриновая (0,1-0,2%), миристановая (0,1-0,3%), пальмитиновая (0,7-6,4%), стеариновая (0,3- 0,7%), пальмито-леиновая (0,1-0,3%), олеиновая (11,0-28,4%), линолевая (56,1-71,5%), лино-леновая (10,3-13,1%).

Соотношение жирных кислот в масле грецкого ореха по мере созревания плодов и образования семян изменяется. Так, в зеленых плодах грецкого ореха линолевой кислоты 71,5%, в зрелых плодах - 56,1%, в зеленых плодах содержание олеиновой кислоты 11,0%, в зрюлых - 0,71% (рис. 4).

Нами изучен аминокислотный состав плодов грецкого ореха. Выделено 17 аминокислот: моноаминодикарбоновые (аспарагиновая и глутаминовая кислоты), диаминомонокарбоновые (лизин), ароматические (фенилаланин, тирозин), серосодержащие (цистин, метионин), циклические (пролин) и другие - глицин, серии, треонин, аланин, валин, лейцин, изолейдин, гистидип, аргинин, что полностью согласуется с данными Р.Э.Лойко и соавт. (1999). По мере созревания плодов грецкого ореха идет количественное накопление всех выявленных нами аминокислот (рис. 5 - 7).

Кроме того, из плодов зеленого грецкого ореха в стадии молочной зрелости нами выделены и идентифицированы: гоглон (2,5%), эфирное'масло (0,04%), галловая кислота (0,03%), эллаговая кислота (0,]%), бета-гидроюглон (0,4%), глюкозид альфа-гидроюглона С^^Ов (0,7%), 3-арабинозпд кверцетина СгоН^О« (0,2 %), 3-арабинозид кемпферола С20Н20О12 (0,5%).

Определен состав эфирного масла (в %): альфа-пинен 10,95, бета-пинен 4,08, хлороформ 2,65, капроновый альдегид 5,29, А3-карен 4,75, кариофиллен 21,54, лонгифолен 15,12, гумулен 7,78, альфа-терпинеол 8,56, гамма-кадинен 7,34, сигма-кадинен 6;35, хамазулен 1,52.

Из масла зеленых плодов ¡редкого ореха были выделены токоферолы, которые идентифициропапы с помощью стандартов токоферолов хлопкового и соевого масел. Соотношение токоферолов оказалось следующим: альфа-токоферолов - 37%, бета-токоферолов — 33%, гамма-токоферолов - 30%.

Изучение состава углеводородного экстракта зеленых плодов грецкого ореха

 

В исследованиях для приготовления 1 кг тодикампа нами использовано зеленых плодов грецкого ореха 1,7 кг, ленефра — 0,75 кг. В процентном отношении грецких орехов - 70%, ленефра — 30% (использован в этом исследовании один из вариантов изготовления тодикампа). При этом способе получения: тодикамп - прозрачная, подвижная жидкость, ярко желтого цвета с характерным запахом. Растворим в нефтепродуктах, ацетоне и других органических растворителях. Не растворим в воде, спирте и не смешивается с кислотами различных концентраций. Нами разработан способ определения подлинности тодикампа. С этой целью 3 мл тодикампа заливают водой до объема 50 мл. К 10 мл полученной смеси прибавляют 2 капли раствора хлорида окисного железа. Смесь окрасилась в зеленый цвет и выпал осадок. Затем 2 мл смеси заливают водой до объема 10 мл, в содержимое добавляют 2 капли раствора хлорида окисного железа. Зеленое окрашивание сохраняется.

• Подлинность тодикампа также определяется спектральным методом в инфракрасном спектре. Сняты ИК-спектры ленефра, тодикампа, ЧСК-1. Спектры сняты в области от 400 до 6000 см"'.

Результаты наших исследований физико-химических свойств тодикампа: плотность при 20°С - от 760 до 770 кг/м3, показатель преломления при 20°С от 1,424 до 1,426, вязкость при 20°С - от 0,70 до 0,90 мм2/с, кислотность -от 1,5 до 3,0 мг КОН на 100 мл препарата, предельные углеводороды - от 47 до 52%, нафтеновые углеводороды, в том числе моно - от 27 до 37%, би-, три от 3 до 9%, ароматические углеводороды - не более 12%, массовая доля непредельных углеводородов - не более 1,4%, механические примеси - отсутствие, вода - отсутствие, содержание серы - от 0,02 до 0,03%, содержание

тяжелых металлов (ванадия, кобальта, молибдена) - отсутствие (до 10'5 %), — сухой остаток - не более 1,5%; содержание свинца - отсутствие - до 10"5 %. В тодикампе относительное содержание жирных кислот общих липидов в процентах от суммы метиловых эфиров жирных кислот составило: линоленовой 10,3, линолевой 71,3, олеиновой 10,5, стеариновой 1,0, пальмитиновой 7,0, пальмитолеиновой, пентадеценовой и миристиновой - следы.

В препаратах тодикамп и ЧСК-1 сохранены биологически активные вещества зеленых плодов грецкого ореха.

Токсичность тодикампа в исследованиях на животных

Тодикамп в различных дозах вводили внутрижелудочно 50-ти самкам и 50-ти самцам аутбредным белым мышам живой массой 20 - 22 г и такому же количеству белым аутбредным крысам живой массой 190 - 210 г. Мыши и крысы были распределены на 10 групп, каждая из которых состояла из двух подгрупп по 5 самцов и 5 самок. Самцы и самки содержались раздельно. До введения препаратов было проведено взвешивание животных, а также исследование крови, которые показали, что группы по массе тела и показателям крови не имели статистически достоверной разницы.

Первая группа мышей составила контрольную группу, животным этой группы вводили внутрижелудочно физиологический раствор от 0,3 до 0,5 мл. Животным остальных групп однократно ввели от 2,0 до 18 г/кг массы тоди-кампа. После введения препарата на 2-3-и сутки в седьмой группе пало две мыши (один самец и одна самка), в 8-й группе - 5 мышей (2 самца и 3 самки), в 9-й группе - 8 мышей (3 самца, 5 самок), в ] 0-й группе - 10 мышей (5 самцов и 5 самок)

По Литчфильду и Уилкоксону были высчитаны летальные дозы тоди-кампа для белых мышей: составила 14666±584,9 мг/кг, ЬД1(5=1 1733,3 МГ/КГ, ЬД84= 16266,7 мг/кг.

Было проведено патологоанатомическое вскрытие павших мышей. Гистологическим исследованием установлены изменения дисциркуляторного характера с очагами некроза клеток и ткапп в мозгу, сердце, печени.

Аналогичные результаты были получены при внутрижелудочном введении тодикампа белым аутбредным крысам. Крысы первой группы служили контролем, им внутрижелудочно вводили от 3,0 до 4,0 мл физиологического раствора. Дозы тодикампа, введенного внутрижелудочно крысам, колебались от 2,0 до 18,0 г/кг. Крысы 2-5-й групп внутргокелудочное введение тодикампа перенесли хорошо, как и животные первой труппы, которым вводился физиологический раствор.

На основании проведенных экспериментальных исследований высчитаны летальные дозы тодикампа при внугрижелудочном введений белым крысам: ЬД5о= 14760,0±501,42 мг/кг, ЬД,6=11674 мг/кг, ЬД(и= 15560 Мг/кг.

На 15 поросятах 4-месячного возраста проведен эксперимент с использованием широкого спектра физиологических, гельминтологических, гематологических, биохимических методов исследований. Из числа этих поросят 5

оказались носителями аскарид и составили 3-ю группу. Первой группе 5-ти поросятам (контрольной) внутрижелудочно вводили по 10 г/кг физиологического раствора, второй группе (5 поросят) агельминтозным, клинически здоровым - по 10 г/кг тодикампа, а третьей группе - по 12 г/кг тодикампа. Комплексные исследования крови были проведены через 7,14,21,30 суток после введения тодикампа. После введения препарата у третьей группы поросят в течение суток было собрано в фекалиях от 1 до 4-х экземпляров аскарид длиной от 11 до 14 см. Затем был проведен убой поросят с последующим исследованием их кишечников на наличие гельминтов. Все поросята освободились от аскарид.

На 10 щенятах породы бигл 4-месячного возраста, распределенных на две группы: 5 щенят (агельмиятозные), 5 щенят (носители токсокар), было проведено испытание высокой дозы тодикампа. До введения препарата было проведено взвешивание животных и применен широкий спектр физиологических, гематологических и биохимических исследований. Первой группе щенят (контрольной) внутрижелудочно введен физиологический раствор в дозе 10 г/кг, второй группе - 10 г/кг тодикампа. В течение суток щенята освободились от токсокар. Их количество колебалось от 1 до 7 экземпляров длиной от 5 до 9 см. Освобождение щенят от гельминтов подтверждено вскрытием кишечников.

Изучение острой токсичности тодикампа на белых мышах и крысах, на обезьянах, поросятах, щенятах показало, что разовое введение внутрижелудочно тодикампа в дозах, превышающих в 100 раз терапевтическую анти-гельминтную (100 мг/кг), не обладает токсическим эффектом.

Подкожное введение тодикампа в область бедра изучено на 6-ти обезьянах, которым препарат вводили в утренние часы (10-12 часов) двукратно с интервалом в 13 дней в дозах 0,02 и 0,1 мл подкожно. Независимо от дозы препарата обезьяны бурно реагировали на его инъекцию. Для уменьшения возможности развития инфильтрата область бедра в месте введения препарата массировали в течение 3-5 мин. Лишь спустя 10—12 мин после инъекции

обезьяны успокаивались- (обычно реакц?и~обезьян на~п/к или в/м инъекцию антибиотиков, витаминов и других препаратов не превышает 2—5 мин).

При частотном и амплитудном анализе ЭКГ, зарегистрированной в стандартных отведениях, не обнаружено нарушений возбудимости и проводимости в миокарде; ритм во время эксперимента оставался синусовым. Суточные колебания хронотропной деятельности сердца соответствовали изменениям, характерным для обезьян, находящимся в фиксированном состоянии в приматологическом кресле (рис. 14,15). Результаты комплексных исследований позволили нам сделать заключение, что препарат не проявил токсического воздействия на организм обезьян.

На 25-ти беспородных собаках и на 15-ти беспородных свиньях, зараженных экспериментально стробилярным и ларвальным эхинококкозом по общепринятым методикам, нами была установлена противоэхинококкозная активность тодикампа. 

Опыты по изучению хронической токсичности тодикампа проведены на 15-ти щенятах, полученных от двух самок-собак породы бигл, и 15-ти поросятах, полученных от одной беспородной свиноматки. Животные содержались в стандартных вивариях, обслуживаемых учеными зооинженерами и ветеринарными врачами.

Каждый вид животных был распределен на 3 группы: контрольной ежедневно однократно в течение 6 месяцев вводили внутрь дистиллированную воду, второй группе щенят - 10 мг/кг (ЕД50) тодикампа, второй группе поросят - 20 мг/кг (ЕД50) тодикампа, третьей группе щенят - 100 мг/кт (ЮЕД50), третьей группе поросят - 200 мг/кг (10ЕД50) тодикампа. Обследование животных контрольных и экспериментальных групп проведено в соответствии со стандартным протоколом, рекомендованным МЗРФ (2000). Испытуемые агенты животным вводили ежедневно в течение 6-ти месяцев, после отмены препаратов наблюдения и исследования проведены в течение последующих 6-ти месяцев.

В течение всего эксперимента животные чувствовали себя хорошо, шерсть была блестящая, видимые слизистые бледно-розового цвета, мочеиспускание и дефекация нормальные, аппетит хороший, активность высокая, развитие и рост соответствовали нормативным показателям собак и свиней. Со стороны сердечно-сосудистой системы отклонении не было.

Статистическая обработка результатов исследований крови собак показала, что в количестве эритроцитов, ретикулоцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, гемоглобине, в лейкоцитарной формуле, гематокрите, скорости свертывания крови, резистентности эритроцитов между контрольной и группами, получавшими тодикамп, статистически существенной разницы нет.

При патологоанатомическом исследовании собак и свиней не обнаружено разницы между контрольными и подопытными животными. Гистологические исследования головного мозга, сердца, печени, почек, легких, селезенки, тимуса, надпочечников, желудка, кишечника, мочевого пузыря, поджелудочной железы, костного мозга, щитовидной железы, лимфатических узлов, семенников у самцов, матки и яичников у самок не выявили разницы между контрольными и опытными собаками и свиньями.

Таким образом, длительное, ежедневное шестимесячное введение внутрь собакам и свиньям тодикампа в дозах ЕД50 и 10 ЕД50 не вызывает функциональных и морфологических изменений в жизненно важных органах.

Установлено, что в терапевтических дозах тодикамп не обладает иммунной токсичностью и аллергизирующимн свойствами.

Изучение эмбриотоксичности тодикампа в основном провели А.Г. Маленков и A.M. Торчинский (1995, 2002) на кроликах породы шиншилла и белых крысах. Использовано 75 кроликов и 75 белых крыс. Исследования были

проведены согласно методическим указаниям по изучению репродуктивной токсичности фармакологических веществ (Любимов Б.И. и соавт., 2000). Установлено, что препарат не обладает эмбриотоксичностью и тератогенными свойствами.

В соответствии с указаниями А.Д.Дурнева и соавт. (2000) изучена способность тодикампа индуцировать генные мутации у бактерий в условиях метаболической активации in vitro и in vivo, аберрации хромосом в клетках костного мозга мышей и доминантные летальные мутации в зародышевых клетках мышей. Мутагенный эффект препарата не обнаружен ни в одном из использованных методоч.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И НОВЫХ ЭКСТРАГЕНТОВ

Изучая острую токсичность тодикампа на обезьянах (макаки-резус) живой массой от 4,4 до 5,2 кг пятимесячного возраста, уход и содержание их проводили согласно разработкам Государственного научного центра РФ Института медико-биологических проблем РАН с использованием методов физиологических, гематологических, биохимических исследований ГНЦ РФ ИМБП РАН. Одна группа из 5-ти обезьян была контрольной. Им вводили физиологический раствор в дозе 10 г/кг, 5-ти обезьянам внутрижелудочно вводили по 10 г/кг тодикампа. До введения препарата через 7, 14, 21,40 дней после введения испытуемого агента проводились комплексные исследования.

Обезьяны контрольной группы клинически здоровые. У обезьян опытной группы, в фекалиях методами гельминтологических исследований были выделены яйца сифачий. В живой массе они несколько отличались от обезьян контрольной группы, а в крови отмечено увеличение количества лейкоцитов, эозинофилов, сегментоядерных нейтрофилов, СОЭ, повышение активности аланиновой (АлАТ) и аспарагиновой (АсАТ) аминотрансфераз, снижение количества лимфоцитов и живой массы.

Через 14 суток после введения обезьянам испытуемого агента в крови животных проявилась тенденция к нормализации изучаемых показателей. Если у гельминтозной группы обезьян до введения тодикампа СОЭ была 7,1±0,8б мм/час, то через 14 суток после введения препарата она уменьшилась до 4,5±0,6 мм/час, если процент эозинофилов был 7,6±0,5, то через 14 суток после введения тодикампа уменьшился до 6,8±0,9, лимфоцитов увеличился с 52,812,4% до 57,0±1,6%. Через 21 сут. после введения тодикампа у инвазированных обезьян произошла нормализация СОЭ и процента содержания лимфоцитов и активности АлАТ и АсАТ.

При изучении токсичности 3-недельного курса лечения эхинококкоза препаратом ЧСК-1 в опытах на 9-ти обезьянах нами было установлено улучшение функционального состояния печени. После комплексных исследований первую неделю ежедневно обезьяны получали внутрь натощак по 150 мг/кг ЧСК-1, вторую неделю - 300 мг/кг, третью неделю - 450 мг/кг ЧСК-1. Препарат животные переносили легсо, без побочного действия. До введения ЧСК-1 в фекалиях всех 9-ти обезьян обнаружены яйца сифачий (видовая принадлежность установлена заражением мышей).

Иммуиотропные и противомпкробиые свойства ЧСК-1 и тодикампа

Опыты проводили на белых беспородных аутбредных мышах-самцах массой 18-19 г. Мышей заражали зародышевыми элементами эхинококков от оперированных больных. Полиоксидоний применен как препарат сравнения с широким спектром иммунотропного действия.

Ампициллин вводили в дозе 50 мг/кг внутримышечно в течение 4 дней, циклофосфан - внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг 5 раз, полиоксидоний - по 1 мг внутримышечно в течение 2-10 дней, левамизол - внутрижелудочно по 30 мг/кг в течение 5-6 дней, тодикамп и ЧСК-1 - внутрижелудочно в дозе 50 мг/кг в течение 2-10 дней. Миелопид вводили под кожу в дозе 1 мг/кг через день, всего 5 инъекций.

Таким образом, эхинококкоз мышей, вызванный человеческими штаммами паразита, сопровождается иммуносупрессией, при которой иммуномоду-ляторы способствуют нормализации нарушенных звеньев клеточного и гуморального иммунитета. Из рассматриваемых в работе препаратов наиболее эффективными оказались полиоксидоний, тодикамп и ЧСК-1.

При иммуносупрессии, вызванной циклофосфаном или эхинококкозом, полиоксидоний, тодикамп и ЧСК-1 проявляют тенденцию к нормализации клеточного и гуморального звена иммунитета, а также фагоцитоза нейтрофилов и макрофагов.

Изучение иммунного статуса 28 хлопковых крыс (7 интактных, 21 зараженная альвеолярным эхинококкозом) дало возможность судить о препарате ЧСК-1 как о современном иммунокорректоре.

Как показали наши исследования, у хлопковых крыс, зараженных альвеолярным эхинококкозом, статистически достоверно увеличивается в крови количество Т-супрессоров, иммуноглобулинов А, М, в и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), но снижается количество Т-лимфоцитов, Т-хелперов.

Семь хлопковых крыс, зараженных альвеолярным эхинококкозом, в течение трех недель получали внутрь препарат ЧСК-1 в возрастающих дозах (первая неделя - ежедневно внутрь 0,1 г/кг, вторая неделя - 0,26 г/кг, третья неделя - 0,34 г/кг), другая группа таких же крыс была пролечена в течение трех недель тактивином, который вводился парентерально ежедневно в дозе 0,2 мл на одно животное.

Под воздействием препарата ЧСК-1 в крови хлопковых крыс статистически достоверно по сравнению с зараженными контрольными животными увеличилось количество Т-лимфоцитов, Т-хелперов, уменьшилось количество иммуноглобулинов А, М, в и ЦИК. Под воздействием тактивина проявилась тенденция к нормализации иммунного статуса у зараженных животных. Но иммунокорригирующие его свойства оказались значительно слабее по сравнению с ЧСК-1. Например, под воздействием тактивина в крови зараженных альвеолярным эхинококкозом крыс увеличилось количество Т-лимфоцитов и эта разница статистически достоверна по сравнению с зараженными нелечеными контрольными животными, но в то же время количество Т-лимфоцитов оказалось статистически достоверно меньшим по сравнению с показателями крыс, леченных ЧСК-1. Показатели гуморального иммунитета крыс, леченных тактивином, оказались неизмененными. Вскрытиями установлено, что тйктивин не вызвал торможения роста паразитарных ларвоцист. Протпвозхинококкозное действие препарата ЧСК-1 неразрывно связано с его иммунокорригирующими свойствами, он резко замедлил рост паразитарных ларвоцист. Результаты исследований на крысах были нами подтверждены на поросятах, зараженных в эксперименте эхинококкозом и пролеченных по указанной методике ЧСК-1, причем препаратом сравнения служил полиоксидоний. В эксперименте с поросятами по иммунокор-ригирующиим свойствам ЧСК-1 не уступил полиоксидонию.

Противомикробная активность тодикампа и ЧСК-1 подтверждена нами определением чувствительности патогенной микрофлоры, выделенной из жидкости эхинококков, паразитировавших у овец (28 голов) и свиней (22 головы). Установлена резистентность общей микрофлоры к кефадиму у 2-х животных (4%), гентамицину - 28-ми (56%), эпоцелииу - 14-ти (28%), кеф-золу- 8-ми (16%), клафорану- 10-ти (20%), тодикампу - 8-ми (16%), ЧСК-1 - 10-ти (20%), пенициллину - 40 (80%), эритромицину - 44-х (88%). В клинических условиях А.Х.Рахимов и соавт. (2002) другим путем подтвердили противомикробную активность тодикампа и ЧСК-1 на уровне кефадима при лечении температурящих больных эхинококкозом, которых прооперировали, а в ларвоцистах выявили патогенную микрофлору, определив чувствительность ее к антибиотикам. Б.У.Сабиров и соавт. (2002) таким же путем установили противостафилококковую активность ЧСК-1 и тодикампа.

На 45-ти овцах, спонтанно заразившихся эхинококкозом, был апробирован трёхнедельный курс лечения эхинококкоза тодикампом. 15 овец составили контрольную группу, им препараты не вводились, 15 овцам в течение трёх недель внутрижелудочно вводился тодикамп в возрастающих дозах, 15 больным эхинококкозом овцам - ЧСК-1. Первую неделю ежедневно вводилось по 100мг/кг, вторую неделю - 260мг/кг, третью неделю - 340 мг/кг испытуемого агента. Через 15 дней курс лечения повторили. Через три месяца после окончания эксперимента животные были убиты и проведены гельминтологические исследования. Эхинококки локализовались в лёгких и печени, величина кист от 0,5 до 3,5 см у леченых и контрольных животных. У леченых животных кисты потеряли упругость, были дряблыми, спавшимися, сморщенными, у контрольных с выраженным внутрипузырным давлением (упругие, плотные). Под воздействием тодикампа произошла гибель зародышевых элементов" на 70 - 80%.

15 обезьян пятимесячного возраста были заражены внутрижелудочным введением яиц эхинококков от собаки-донора, заражённой эхинококком от прооперированного больного. Доза на одно животное 3000 яиц. Через 15 дней после заражения у всех 15-ти обезьян была положительная реакция ско-лексопреципитации и антигенсвязывания лимфоцитов на эхинококкоз. Через 30 дней после заражения 8-ми обезьянам проведён трёхнедельный курс лечения в возрастающих дозах ЧСК-1 и 7-ми обезьянам — в возрастающих дозах тодикампом. Дозы аналогичны, вводимым крысам и овцам при эхинококхо-зах. Через месяц после проведённого лечения произошло угасание иммунологических реакций, а через 90 дней после заражения они были отрицательными. Животные в здоровом состоянии выведены из эксперимента. Используя известные методы, мы произвели заражение 30 белых аутбредных крыс гидатидозным эхинококкозом (ГЭ) и 30 белых мышей - альвеолярным эхи-нококкозом (АЭ).

Через 10 дней после заражения у 5-ти белых крыс и 5-ти белых мышей была определена исходная масса развившихся паразитарных ларвоцист (ТТЛ). В течение трех недель в возрастающих дозах 10-ти зараженным ГЭ крысам вводили пнутрнжелудочно тодикамп, 10 — ЧСК—I. Дозы препаратов одинаковые. Первую неделю ежедневно по 0,2 г/кг, вторую неделю - 0,52 г/кг, третью неделю - 0,64 г/кг. Суммарная доза по каждому препарату составила 9,8 г/кг.

В таких же дозах 10-ти зараженным АЭ мышам внутр!окелудочно вводили тодикамп, 10 - ЧСК-1. 5 зараженных ГЭ крыс и 5 зараженных АЭ мышей составили контрольные группы. Им антигельминтики не вводили. По дозе препаратов вводилась дистиллированная вода. Токсического действия препаратов не проявилось, ИТРПЛ оказались выше 90 % для испытуемых агентов.

Результаты наших исследований на животных перепроверены руками других ученых (Лось Д.П., 1998; Погосов А.Г., 1998; Турсунов Б.С. и др., 2000; Габченко А.К. и др., 2000; Сабиров Б.У. и др., 2000; Мамутов С. и др., 2002) и получено подтверждение противоэхинококкозного эффекта тодикампа и ЧСК-1.

При экспериментальном сифачиозе и гименолепидозе белых мышей препараты тодикамп и ЧСК-1 в дозе 100мг/кг полностью, как показало вскрытие, освободили животных от инвазии. Однако, при трихоцефалезе мышей дозы препаратов в 300 мг/кг оказались неэффективными. Даже дозы 500мг/кг не освободили всех животных от инвазии.

На 6-ти группах кроликов по 7 животных в каждой, спонтанно заразившихся чесоткой, проведено протипопаразнтарное испытание 20%-ной эмульсии бензилбензоата, тодикампа и ЧСК-1. Первая группа кроликов была контрольной и апплицировалась дистиллированной водой. Вторая группа животных обрабатывалась 20%-ной эмульсией бензилбензоата, третья - тоди-

кампом, четвертая - смесью 20%-ной эмульсией бензилбеизоата и тодикампа (эмульсии 90%, тодикампа 10% по массе), пятая - ЧСК-1, шестая - 20%-ной эмульсией бензипбензоата и ЧСК-1 (эмульсии 90%, ЧСК-1 - 10% по массе) три раза с интервалом в сутки. После лечения в контрольной группе все семь кроликов остались больными, во второй - выздоровели 4 кролика, в третьей - 5, в четвертой - 7, в пятой - 4, в шестой - 7. Таким образом, тодикамп и ЧСК-1 обладают противочесоточными свойствами на уровне 20%-ной эмульсии бензипбензоата. Под воздействием 10% тодикампа или ЧСК-1 усиливается противочесоточная активность бензилбеизоата.

Б.С.Турсунов и соавт. (2002) несмотря на то, что возбудитель чесотки специфичен для вида хозяина, провели клиническое испытание тодикампа и ЧСК-1 в сочетаниях препаратов, примененных нами в эксперименте, на 67-ми больных чесоткой в клинических условиях, подтвердив наш результат.

 

Лечение тодикампом суставов и поясницы. Исследования на спортсменах

А.Г.Маленков и соавт. (1995) сообщили о проведенном клиническом испытании тодикампа на спортсменах, страдавших обострением пояснично-крестцового радикулита.

Клинические испытания тодикампа (на добровольцах) проводили в сравнении с мазью апизартрон (Германия) с целью выявления противовоспалительного и местнораздражающего действия у спортсменов с обострением пояснично-крестцового радикулита.

Все обследуемые спортсмены проходили диспансеризацию.

До лечения спортсмены прошли широкий спектр физиологических, биохимических, инструментальных исследований. Эти исследования проведены в процессе и после окончания лечения. Из наблюдений исключались спортсмены, у которых выявлены аллергические заболевания.

Больным спортсменам проводилась аппликация тодикампом области болевой зоны в поясничном отделе с предварительной экспозицией в 5 минут с целью подбора индивидуальной пороговой чувствительности для каждого спортсмена. Положительной считалась экспозиция с появлением гиперемии и ощущением жжения, тепла и покалывания. Время экспозиции составляло от 5 до 60 минут. Продолжительность лечения в течение 10 сут.

В результате был установлен выраженный положительный эффект, что выражалось в уменьшении болевых симптомов у 14-ти больных, удовлетворительный результат у 6-ти спортсменов, у одного больного эффект отсутствовал в связи с толерантностью к препарату, у двух спортсменов в начале лечения - ожог 1-й и 2-й степени.

Б.У.Сабиров и соавт. (2000), Б.С.Турсунов и соавт. (2000) испытали препарат ЧСК-1 в виде компрессов при лечении 117 больных эхинококкозом. Возраст больных от 18 до 50 лет. У этих больных, по данным авторов, наружное применение препарата ЧСК-1 при лечении артральгии, миальгии, радикулита, люмбаго, ушибов и растяжений, острого бурсита и тевдовапшита не уступило традиционному лечению с использованием препарата сравнения финалгоновой мази.

Оценивая результаты вышеотмеченных авторов, можно сделать заключение, что тодикамп обладает хорошей терапевтической активностью при обострении пояснично-крестцовых радикулитов различной этиологии. Препарат является достаточно эффективным противовоспалительным, анальгезирующим и местнораздражающим средством. Обладает хорошим согревающим и миорелаксирующим эффектом, что позволяет его применять также в качестве средства для профилактики перенапряжения нервно-мышечного аппарата после интенсивных физических нагрузок. 

Тодикамп - результаты в лечении животных

Не осталась в стороне в испытании тодикампа и ЧСК-1 и ветеринарная наука. По просьбе руководителей животноводства и ветеринарии Республики Узбекистан нами были переданы для производственного испытания препараты тодикамп и ЧСК— 1. Была создана авторитетная комиссия, в состав которой вошли доктора ветерштрных наук, а также представители медицинской науки. Был составлен акт о результатах испытания препаратов тодикамп и ЧСК-1 для лечения различных заболеваний животных. Приводим содержание этого документа.


Препараты тодикамп и ЧСК-1 испытали при лечении 97 голов истощенного молодняка крупного рогатого скота, не поддающегося лечению антибиотиками и другими препаратами. Это были ослабленные животные, которые отставали в росте и развитии. Обычно такие животные погибают. Препарат вводился в течение 5-ти дней ежедневно внутрижелудочно в дозе по 0,1 мл/кг. Все животные выздоровели.

Тодикамп и ЧСК-1 испытаны на 500 цыплятах, пораженных аскари-диозом и гетеракидозом. 250 цыплят лечили тодикампом, 250 цыплят лечили ЧСК-1. Доза 0,5 мл/кг внутрижелудочно. Все цыплята выздоровели.

1250 голов овец, пибракотзаиных из стада, ио как показали специальные исследования, больные эхинококкозом, были поставлены на откорм. 620 пролечены тодикампом, 630 - ЧСК—1. Применен 3-недельный курс лечения в возрастающих дозах: первую неделю 0,1 мл/кг, вторую неделю 0,2 мл/кг, третью неделю 0,3 мл/кг. У животных наступило выздоровление, на вскрытии большинство эхинококков и зародышевых элементов погибло. Получен высокий экономический эффект.

На 28-ми овцах, больных эхинококкозом, успешно использован тоди-камп и ЧСК-1 для коррекции остаточной полости, что внедрено в медицинскую хирургию при лечении эхинококкоза.

Трехнедельным курсом тодикампом и ЧСК-1 успешно пролечены 30 овец с поражением саркоцистозом сердца, на вскрытии установлена гибель паразитов.

75 поросят-заморышей со вторичным иммунодефицитом получили в течение недели по 0,5 мг/кг препаратов (41 - тодикамп, 34 - ЧСК-1). Животные выздоровели - получен хороший экономический эффект. Препараты также оказались эффективными при лечении аппликациями пораженных копыт (75 телят, 150 ягнят, 35 жеребят).

Очень эффективными испытуемые лекарства оказались при лечении болезней суставов телят неизвестной этиологии (87 телят), у них был выражен вторичный иммунодефицит.

На 37 собаках, больных токсокарозом, токсаскаридозом, проверен тодикамп в дозе 0,3 мл/кг. Все животные освободились от паразитов с последующим выздоровлением. 57 коров вылечены от тимпании такой же дозой.

На 39 свиньях, пораженных аскаридозом, испытан тодикамп в дозах 0,2 мл внутрь, все животные выздоровели.


При любых иммунодефицитных состояниях, гастритах, гепатитах и функциональной недостаточности печени животных в малых дозах эффективны тодикамп и ЧСК (0,05 мг/кг), а при паразитарных заболеваниях дозу препаратов надо увеличивать до 0,1 - 0,3 мл/кг. Препараты нетоксичны, не обладают побочным действием.

ВЫВОДЫ

Обнаружены в плодах грецкого ореха биологически активные вещества: белок, аминокислоты, дубильные вещества, сахара, клетчатка, жирные масла, витамины.

В масле плодов грецкого ореха идентифицированы следующие жирные кислоты: каприоловая (0,1-0,2%), лаури-новая (0,1-0,2%), миристиновая (0,1-0,3%), пальмитиновая (0,7-6,4%), стеариновая (0,3-0,7%), пальмитолеиновая (0,1-0,3%), олеиновая (11,0-28,4%), линолевая (56,1-71,5%), линоленовая (10,3-13,1%). Зеленые плоды грецкого ореха богаты витаминами: С, РР, Вь В2, каротином.

Из плодов зеленого грецкого ореха в стадии молочной зрелости нами выделены: юглон (2,5%), эфирное масло (0,04%), галловая кислота (0,03%), эллаговая кислота (0,1%), бета - гидроюглон (0,4%), глюкозид альфа-гидроюглона С^НиОз (0,7%), 3-арабинозид кверцетина C2oHi808 (0,2 %), 3-арабинозид кемпферола С20Н20О12 (0,5%). Состав эфирного масла (в %): аль-фа-пинен 10,95, бета-пинен 4,08, хлороформ 2,65, капроновый альдегид 5,29, Д3-карен 4,75, кариофиллен 21,54, лонгифолен 15,12, гумулен 7,78, альфа-терпинеол 8,56, гамма-кадинен 7,34, сигма-кадинен 6,35, хамазулен 1,52. Масло зеленых плодов грецкого ореха содержало альфа-токоферолов - 37%, бета-токоферолов - 33%, гамма-токоферолов - 30%.

Тодикамп не обладает иммунотоксичностыо, эмбриотоксичностью, мутагенной и ДНК-повреждающей активностью, аллергизирующими свойствами. Длительная аппликация кожи животных тодикампом не приводит к функциональным и морфологическим изменениям жизненно важных органов. 

На лабораторных моделях сифачиоза и гименолепидоза белых мышей тодикамп или ЧСК-1 в дозе 100 мг/кг при разовом внутрижелудочном введении освобождает всех животных от инвазии. 

При экспериментальном токсическом гепатите белых мышей под воздействием внутрижелудочного введения тодикампа или ЧСК—1 летальность снижалась на 20-40% . При экспериментальном токсическом гепатите собак под воздействием внутрижелудочного введения терапевтических доз ЧСК-1 наступала нормализация биохимических показателей крови, характеризующих функциональное состояние печени животных. В эксперименте с обезьянами с функциональной недостаточностью печени под воздействием изучаемых препаратов происходила в крови нормализация уровня аминотрансфе-раз.

Эхинококкоз мышей, вызванный человеческими штаммами паразита, сопровождался иммуносупрессией, при которой иммуномодуляторы способствовали нормализации нарушенных звеньев клеточного и гуморального иммунитета. При этом наиболее эффективными оказались полиоксидоний, то-дикамп и ЧСК-1. При иммуносупрессии, вызванной циклофосфаном или эхинококкозом, полиоксидоний, тодикамп и ЧСК-1 проявляют тенденцию к нормализации клеточного и гуморального звена иммунитета, а также фагоцитоза нейтрофилов и макрофагов. Экспериментальный альвеолярный эхи-нококкоз хлопковых крыс сопровождается вторичным иммунодефицитом. Трехнедельное внутрижелудочное введение терапевтических доз ЧСК-1 приводит к нормализации показателей иммунитета.

Тодикамп и ЧСК-1 обладают противомикробными свойствами при внутрибрюшинном заражении мышей Proteus miriabilis - 4641, так как продлевают продолжительность жизни мышей. Патогенная микрофлора, выделенная из жидкости ларвоцист эхинококка, оказалось чувствительной к тодикампу и ЧСК-1 на уровне кефзола, клафорана, кефадима.

9.Тодикамп является достаточно эффективным противовоспалительным, анальгезирующим и местнораздражающим средством. Препарат тодикамп рекомендуется для применения в практике спортивной медицины. Тодикамп и ЧСК-1 успешно применены в ветеринарии при лечении гельминтозных заболеваний, а также при токсическом гепатите и заболеваниях дорогостоящего молодняка крупного рогатого скота неизвестной этиологии, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами.

Медицинские Диссертации http://medical-diss.com/farmakologiya/izuchenie-toksichnosti-i-farmakologicheskoy-aktivnosti-preparatov-na-osnove-lekarstvennogo-rastitelnogo-syrya-i-novyh-eks#ixzz6NeCnFmWy

Комментарии

Комментариев пока нет

*Я согласен(на) на обработку моих персональных данных:
Подробнее